荧光显微镜的原理和结构特点

发布时间:2013-05-20 阅读量:1616 来源: 我爱方案网 作者:

关于荧光显微镜对大家来说应该不是很陌生吧,但是要是说荧光显微镜的原理和结构特点我想应该就很多人不明白了吧,下面小编今天就给大家介绍的就是荧光显微镜的原理和结构特点

荧光显微镜原理

 
荧光显微镜通常是利用一个高发光效率的点光源,并经过滤色系统发出一定波长的光作为激发光、激发标本内的荧光物质发射出各种颜色的荧光后,然后再通过物镜和目镜进行放大,以便更好地进行观察。同时在强烈的对衬背景下,即使荧光很微弱也很容易辨认,且敏感性较高,主要可用于细胞结构和功能及化学成分等的研究。

                            

                                     图1、荧光显微镜原理

荧光显微镜采用的荧光光源一般为超高压汞灯,它可发出各种波长的光,且每种荧光物质都会有一个产生最强荧光的激发光波长 ,这时需加置激发滤片,通常有紫外、紫色、蓝色及绿色激发滤片,仅需使一定波长的激发光透过并照射到标本上,并将其他光都吸收掉。同时在每种物质被激发光照射后,更可在极短时间内发射出比照射波长更长的可见荧光。

 

荧光显微镜的结构类型

荧光显微镜的基本构造通常由普通光学显微镜再加一些如荧光光源 、激发滤片、双色束分离器及阻断滤片等附件的基础上组成。


透射式荧光显微镜

 
激发光源常会通过聚光镜穿过标本材料来激发荧光。常用的有暗视野集光器,更可用普通集光器,同时可调节反光镜并使激发光转射和旁射到标本上。其优点为低倍镜时荧光强,而缺点就是随放大倍数的增加而令荧光减弱,所以对于观察较大的标本材料来说是较好的。

 

                                    图2荧光显微镜结构图

落射式荧光显微镜

 
落射式荧光显微镜是近代发展较快的新式荧光显微镜,较为不同的是激发光从物镜向下落射至标本表面,并可用同一物镜作为照明聚光器和收集荧光的物镜。同时光路中需加上一个双色束分离器,一般他与光铀呈45°角,激发光被反射到物镜中,并聚集到样品上,且样品所产生的荧光及由物镜透镜表面、盖玻片表面反射的激发光会同时进入物镜,反射回到双色束分离器,并使激发光和荧光分开,且残余的激发光会再被阻断滤片吸收。可换用不同的激发滤片、双色束分离器及阻断滤片的组合插块,更可满足不同荧光反应产物的需要。这种荧光显微镜的优点就是视野照明较为均匀,且成像清晰,通常放大倍数越大荧光会越强。

总结

需要注意的是,荧光通常具有专一性,一般都较激发光弱,且为了能观察到更专一的荧光,并在物镜后面需加阻断或压制滤光片。其作用是:一是吸收或阻挡激发光进入目镜、以更好的避免干扰荧光或损伤到眼睛,二是可选择并使特异的荧光透过,更能表现出专一的荧光色彩。同时注意,两种滤光片须选择配合使用。以上就是小编今天要和大家所说的关于荧光显微镜的原理和结构特点的方面介绍了。如果还有什么不明白的地方可以继续浏览网站的其他文章。

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